Si tratta del refettorio di un grande monastero di monache camaldolesi, rinnovato nel Quattrocento.

Il Cenacolo è un solenne ambiente dominato nella parete di fondo dai grandiosi affreschi di Andrea del Castagno che, intorno al 1445, vi dipinse con grande forza espressiva, contrastato senso del colore e attenta struttura prospettica, l'Ultima Cena e, superiormente, la Crocifissione, la Deposizione e la Resurrezione.
In questo piccolo, ma interessantissimo Museo, si ammirano, ancora, altre opere di pittori quattrocenteschi dell'ambito di Andrea del Castagno.